ペプシンの至適pH、至適温度
目的
タンパク質分解酵素のペプシンを用いて、 タンパク質の人工消化試験
を行い、酵素の性質すなわち、 pH、 温度に対する特異性の概要を
観察する。
器具·試薬
恒温槽
卵白懸濁液、粗ペプシン溶液、 0.04%~4%HCI、 1%Na2C03、
PH試験紙
一操作-
1.ペプシンの至適pH
の7本の試験管を用意し、下記のように AとCを試験管に取り、提搾した後、
40°℃で5分間予備加温する (40℃の恒温槽へ)。
A基質
B 酵素
c pH変化
pH
1
卵白懸濁液 2.0ml
粗ペプシン溶液 1.0ml
4% HCI
2.0ml
2
卵白懸濁液 2.0ml
粗ペプシン溶液 1.0ml
0.4% HCI
|2.0ml
3
卵白懸濁液 2.0ml
粗ペプシン溶液 1.0ml
0.04% HCI
2.0ml
4
卵白懸濁液 2.0ml
粗ペプシン溶液 1.0ml
純水
|2.0ml
5
卵白懸濁液 2.0ml
粗ペプシン溶液 1.0ml
1% Na2CO3
|2.0ml
6
卵白懸濁液 2.0ml
純水
1.0ml
4% HCI
2.0ml
7
卵白懸濁液 2.0ml
純水
1.0ml
1% NazCO3
2.0ml
②予備加温後、 恒温槽に入れた状態で B.を加える。
の白濁の様子を0分から5分おきに、20分まで白濁の様子を観察する。
注意) 観察は、 恒温槽に入れたままの状態で行うこと。
④透明になったもの、 20分経過したものは、 pH試験紙でpHを測定する。
* 表の黄色枠内のphは各自で手計算を行うこと。