Question

にひ

𝐭𝐫𝐢𝐬ｰHCL緩衝液とEDTA溶液と滅菌水の必要量の求め方を教えてください。

・10μg/mLRNase A を含む TE緩衝液 (pH8.0)の作成
TE緩衝液の組成:10mM (mmol/L) Tris-HCI (pH8.0), 1mM EDTA (pH8.0)
1M Tris-HCI 緩衝液、 0.5 M EDTA 溶液、滅菌水を用いて、 まず 2.0mL 容マイクロチュ
ーブ内で1.4mLのTE 緩衝液を作成する。 その後、 10mg/mLRNase A 溶液を終濃度が
10μg/mLとなるように添加する*1。
14
64mL
2.8mL
10 1383 1
① まず、奇数班と偶数班がそれぞれ、 1M Tris-HCI 緩衝液、 0.5M EDTA 溶液、 滅菌水、
10mg/mL RNase A 溶液の必要量(μL)を算出し、 両班で結果を確認し合う。
② ①の結果にもとづき、 奇数班が2班分 (合計 1.4mL) を作成する。 10mg/mL RNase
A 溶液については必要量をTA に伝えて添加してもらう。
*1RNase A 溶液の添加によって全体の体積はわずかに増加するため、厳密に考えると終
濃度は10μg/mLからわずかにずれるが、この差はごく小さく、今回の実験には影響
しないため体積増加分は考慮しなくてよい。
*2 予習として算出しておくこと。