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Biology Senior High

下記の問題を教えて欲しいです

B) 欠失 口の部分を欠失させる場合 部位特異的変異導入の実際 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACITGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTGAてCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' * 欠失を行う のより正確なPCR用DNAポリメラーゼを使う 2変異の入ったPCR用プライマーの設計 変異を入れたいところを中心に、前後の広い範囲の 塩基配列(相補鎖も)を書き出す。 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACIGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTG|CTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5 オーバーラップ領域を15 base 選定する。 (変異部分をなるべく中心にする) 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGAC|GAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTG|CTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' * 変異部分 から 18 base 3" 側に伸ばす。 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGAC|GAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTG|てTTTTGGGACてGてAATGGGTTG-5' 部分を削除して、プライマー配列とする 5-TCGTGAC「GAAAACCCTGGCGTTACC-3" プライマー内部の塩基配列を変えることで、終止コドン 挿入やアミノ酸の置換、欠失や挿入が可能 A) 置換 3-CAAAATGTTCGAGCACTG|TTTTTGGG-5" *欠失のサイズに制限はありません。 タカラバイオのキットのマニュアルより 図3B. 欠失変異のためのプライマー設計 GAC」の部分を TGA に置換する場合 C) 挿入 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTGACCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' * 置換を行う |の部分に(CTCGAG)を挿入する場合 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTTGATGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCAACT|ACCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' GGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3" 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGAC1 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTGA|CCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' オーバーラップ領域を15 base 選定する。 (変異部分をなるべく中心にする) * Insertion を行う 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTTGATGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCAACT|ACCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACTCTCGAGGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTGAGAGCTC|CCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' * 変異部分 口から 18base 3"側に伸ばす オーバーラップ領域を15 base 選定する。 (変異部分をなるべく中心にする) 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTTGATGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3" 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCAACTACCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5" 部分を削除して、プライマー配列とする 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACTCTCGAGGGGAAAACCCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTGAGAGCTC|CCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5" * 変異部分 から 18 base 3'側に伸ばす 5-CGTCGTTGATGGGAAAACCCTGGCGTT-3' 3-CAGCAAAATGTTCGAGCAACTACCCTT-5" 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACTCTCGAGGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3" 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTGAGAGCTCてててTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5" *1~15塩基の置換が可能です。 部分を削除して、プライマー配列とする 図3A.置換変異のためのプライマー設計 5-GACTCTCGAGGGGAAAACCCTGGCGTTA-3' 3-AAAATGTTCGAGCACTGAGAGCTCてててTT-S" *1~15塩基の挿入が可能です。 この場合は終止コドンだが、任意のコドンに変換して 対応するアミノ酸に置換することが可能 図3C. 挿入変異プライマーの設計 課題0-5 図AのGACはASP(アスパラギン酸)のコドンである。ここを下記のアミノ酸に置換する時の塩基配列を記せ 1) Met、2)Trp、3) His (2種類あり) コドン表は第8回の資料を参照し、 DNA配列で回答すること(UはT)。

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Biology Senior High

この文章を読んで疑問点や誤りなどありますか??

約38億年前に誕生したと考えられる生物は非常にシンプルで、今の原核生物 に似たものだったのではないかと考えられている。 その後約20億年前に単細胞 の真核生物が、約10億年前に多細胞生物が生まれたと考えられている。発現制 御の高度化、タンパク質の多機能化がこれを実現した。 生物の遺伝情報はDNAの配列*として保存されている。DNAの配列は転写・翻 訳といった過程を経てタンパク質となる。タンパク質は酵素や受容体などとして 細胞内外で特定の機能をもって働く。 タンパク質がコード*されている配列を「遺伝子」と呼んでいる。ヒトは30億 塩基対 (base pair 以下bpとする) からなるDNAを持っている。このDNAには 約20.000個の遺伝子がコードされている。ヒトの遺伝子の長さは平均すると約 10.0005bpであることが知られている。 となると遺伝子がコードされている長さ は20.000 x 10.000 bp = 2.0x108 bpとなる。これはDNA全体の1/4ほどであ る。 多細胞生物において、すべての細胞の核にあるDNAは同じものであるが、す べての細胞ですべての遺伝子が発現?*しているわけではない。例えば心筋では心 筋として働くための遺伝子だけが発現する。そのとき消化酵素の遺伝子や光の 受容体の遺伝子などは発現しない。このため、多細胞生物のある細胞を培養し てもクローンを作ることはできない。この問題をクリアし、世界で初めて作成さ れたクローンは羊のドリーと呼ばれる個体であった。このような技術はさまざ まな医療分野・研究分野で期待されており、iPS細胞を角膜細胞へと変化させた 細胞シートをもちいた移植手術が大阪大学で行われたことは記憶に新しい。

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約38億年前に誕生したと考えられる生物は非常にシンプルで、今の原核生物 に似たものだったのではないかと考えられている。 その後約20億年前に単細胞 の真核生物が、約10億年前に多細胞生物が生まれたと考えられている。発現制 御の高度化、タンパク質の多機能化がこれを実現した。 生物の遺伝情報はDNAの配列*として保存されている。DNAの配列は転写・翻 訳といった過程を経てタンパク質となる。タンパク質は酵素や受容体などとして 細胞内外で特定の機能をもって働く。 タンパク質がコード*されている配列を「遺伝子」と呼んでいる。ヒトは30億 塩基対 (base pair 以下bpとする) からなるDNAを持っている。このDNAには 約20.000個の遺伝子がコードされている。ヒトの遺伝子の長さは平均すると約 10.0005bpであることが知られている。 となると遺伝子がコードされている長さ は20.000 x 10.000 bp = 2.0x108 bpとなる。これはDNA全体の1/4ほどであ る。 多細胞生物において、すべての細胞の核にあるDNAは同じものであるが、す べての細胞ですべての遺伝子が発現?*しているわけではない。例えば心筋では心 筋として働くための遺伝子だけが発現する。そのとき消化酵素の遺伝子や光の 受容体の遺伝子などは発現しない。このため、多細胞生物のある細胞を培養し てもクローンを作ることはできない。この問題をクリアし、世界で初めて作成さ れたクローンは羊のドリーと呼ばれる個体であった。このような技術はさまざ まな医療分野・研究分野で期待されており、iPS細胞を角膜細胞へと変化させた 細胞シートをもちいた移植手術が大阪大学で行われたことは記憶に新しい。

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