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生物 高校生

下記の問題を教えて欲しいです

B) 欠失 口の部分を欠失させる場合 部位特異的変異導入の実際 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACITGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTGAてCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' * 欠失を行う のより正確なPCR用DNAポリメラーゼを使う 2変異の入ったPCR用プライマーの設計 変異を入れたいところを中心に、前後の広い範囲の 塩基配列(相補鎖も)を書き出す。 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACIGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTG|CTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5 オーバーラップ領域を15 base 選定する。 (変異部分をなるべく中心にする) 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGAC|GAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTG|CTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' * 変異部分 から 18 base 3" 側に伸ばす。 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGAC|GAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTG|てTTTTGGGACてGてAATGGGTTG-5' 部分を削除して、プライマー配列とする 5-TCGTGAC「GAAAACCCTGGCGTTACC-3" プライマー内部の塩基配列を変えることで、終止コドン 挿入やアミノ酸の置換、欠失や挿入が可能 A) 置換 3-CAAAATGTTCGAGCACTG|TTTTTGGG-5" *欠失のサイズに制限はありません。 タカラバイオのキットのマニュアルより 図3B. 欠失変異のためのプライマー設計 GAC」の部分を TGA に置換する場合 C) 挿入 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTGACCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' * 置換を行う |の部分に(CTCGAG)を挿入する場合 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTTGATGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCAACT|ACCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' GGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3" 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGAC1 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTGA|CCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' オーバーラップ領域を15 base 選定する。 (変異部分をなるべく中心にする) * Insertion を行う 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTTGATGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCAACT|ACCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACTCTCGAGGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTGAGAGCTC|CCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5' * 変異部分 口から 18base 3"側に伸ばす オーバーラップ領域を15 base 選定する。 (変異部分をなるべく中心にする) 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTTGATGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3" 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCAACTACCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5" 部分を削除して、プライマー配列とする 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACTCTCGAGGGGAAAACCCCTGGCGTTACCCAAC-3' 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTGAGAGCTC|CCCTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5" * 変異部分 から 18 base 3'側に伸ばす 5-CGTCGTTGATGGGAAAACCCTGGCGTT-3' 3-CAGCAAAATGTTCGAGCAACTACCCTT-5" 5-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACTCTCGAGGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAAC-3" 3-GCAGCAAAATGTTCGAGCACTGAGAGCTCてててTTTTGGGACCGCAATGGGTTG-5" *1~15塩基の置換が可能です。 部分を削除して、プライマー配列とする 図3A.置換変異のためのプライマー設計 5-GACTCTCGAGGGGAAAACCCTGGCGTTA-3' 3-AAAATGTTCGAGCACTGAGAGCTCてててTT-S" *1~15塩基の挿入が可能です。 この場合は終止コドンだが、任意のコドンに変換して 対応するアミノ酸に置換することが可能 図3C. 挿入変異プライマーの設計 課題0-5 図AのGACはASP(アスパラギン酸)のコドンである。ここを下記のアミノ酸に置換する時の塩基配列を記せ 1) Met、2)Trp、3) His (2種類あり) コドン表は第8回の資料を参照し、 DNA配列で回答すること(UはT)。

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生物 高校生

ブルーホワイトセレクションの問題です。 最初から分からないので、教えてください。 また、この問題がどこ大?何年度のセンター?か、分かれば教えてください(分かればでいいです)

図2に示した目的の遺伝子をプラスミドに組み込む操作を行った。目的の遺伝子 は塩基配列Iと塩基配列Iではさまれている。また図3に示した大陽菌のプラスミ ドは、B-ガラクトシダーゼ遺伝子と抗生物質Aの耐性遺伝子をもち、B-ガラクト シダーゼ遺伝子の中に塩基配列目をもつ。 塩配列1~Ⅲには, 制限酵素Bamll1. HindI, EcoRVが認識する配列がある。 それぞれの矢印は転写の方向である。 同一の塩基配男をもつ DNA 派片を得るための操作をクローニングといい。 PCR 法や、遺伝子組換えを利用する方法がある。 PCR法は目的の DNA を DNAポリメ ラーゼを用いて試験管内で増幅させる方法である。 遺伝子組換えを利用する方法は、 まず目的の遺伝子を含む DNA と大腸菌のプラスミドを、 同じ制限酵素で処理する。 目的の遺伝子を含む DNA の切断面とプラスミドの切断面は1本鎖部分の塩基どう しが相補的に水素結合するので、 DNA リガーゼを用いてヌクレオチド鎮どうしの 切れ目をつなぎ合わせ、目的の遺伝子をプラスミドに組み込むことができる(図1)。 こうしてつくられた組換えプラスミドを大腸菌に導入する。 この大腸直を培養すれ ば、大陽菌の増殖とともにプラスミドも増え、 目的とする DNA を大量に得ること 抗生物質Aの 耐性遺伝子 プロモーター 目的の遺伝子 一塩基配列 amHI Hind ECORV BamHI FroRVBamHI ベクター く 塩基配列1 塩基配列I ができる。 図 3 図 2 目的の遺伝子 GAATTC CTTAAG GAATTC DNA GAAT TAC CTTAAG 染色体 DNA 制限酵素の切断部分 大腸菌 AAT。 TTA。 プラスミドー 目的遺伝子からつく られるタンパク質の かたまり 図 1 DNAリガーゼ>

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生物 高校生

(3)と(4)の解き方、どなたか分かりませんか❓

0 次の文章を読み,下の問いに答えよ。 (1) la) 2 0。ます,遺伝子 DNA の一方の鎖の塩基の配列にしたがって、ヌクレオチドを 系材としてRNA が合成される。この RNAがmRNA である。MRNA に写与し取 られた情報は、 基配列をもとにしてアミノ酸の配列に変換されてタンパク質がつくられる。 下線部(a)~(c)に最も関係のある語を,次の0~6のうちから1つずつ選へ。 0 複製 3 1 3 3つの塩基が一組となって1つのアミノ酸を指定し、(c)この塩 6 アンチコドン (4)ア(7) 2 転写 3 翻訳 @ コドン (2) 下線部(a)に関して、DNA から写し取られた mRNA の塩基配列が1 UCAUGCGAUGCGUAAGCCG·」であった場合,鋳型となったDNA の塩 基配列として最も適当なものを,次の①~④のうちから1つ選べ。 0 の の AGUACGCUACGCAUUCGGC -.. TCATGCGATGCCTAAGCCG· . *UGTUCGCAUCGCUTTCGGC· * AGTACGCTACGCATTCGGC 2番目の塩基 C *(3)下線部(b)に関して,3つ の塩基の組合せは64種類あ り,それらに20 種類のアミ ノ酸が対応する。その対応表 を右に示した。アルギニン, 開始コドン,終始コドンを指 定する3つの塩基の組合せと していずれにもあてはまらな いものを,次の0~①のうち から1つ選べ。 0 CGU (4)下線部(c)に関連して, 次の文章中のア], イ の0~Oのうちから1つずつ選べ。 ただし, 同じものを繰り返し選んでもよい。 MRNA の塩基UGG はトリプトファンを指定し, UCX(X は A. C, G, またはUを表す)およ び AGY(YはUまたはCを表す)はいずれもセリンを指定する。塩基配列に偏りがないと仮定す ると,任意の3つの塩基がトリプトファンを指定する確率はア]分の1となり,セリンを指定 する確率はトリプトファンを指定する確率のイ]倍と推定される。 0 4 G UGU A U UAU UAC. チロシン システイン UUU 1フェニル UCU |UUC 「アラニン UCC UCA UCG CCU UGC UGA(終止) UGG トリプトファン セリン U |UUA UAA (終止) UAG UGJロイシン CUU CUC CUA CUG CGU CAU CAC CAA CAG 」ヒスチジン CGC プロリン CGA CGG」 アルギニン ロイシン グルタミン C CCA CCG AGUセリン AAU AAC |アスパラギン ACU AUC イソロイシン| ACC ACA AUG メチオニン(開 ACG GCU GCC GCA GCG AUU AGC トレオニン A AUA AGA AGG アルギニン AAG」リシン GUU GUC G GAU アスパラギン酸 GAC GAA GAG GGU GGC バリン アラニン GGA グリシン GUA GUG グルタミン酸 2 AGU 3 AUG の UGA 6 UAA 6 UAG の AGA 」に入る数値として最も適当なものを, 下 ② 6 3 8 の 16 6 20 6 32 O 64 の細目の塩基 SocGpCAG_UCAGUCAG 番目の短基

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