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(1) プラスミドAの転写調節についての、以下の問い①~③に答えよ。ヒーロー
プロモーターに結合するものは何か。出
lat② オペレーターに結合するものは何か。
YV
5
③ X-gal は, β-ガラクトシダーゼで分解されるが、 同じくこの酵素の基質であるラクトース
とは違い, β-ガラクトシダーゼの発現を誘導しない。 β-ガラクトシダーゼの発現を誘
導させるために培地に加えたIPTG は、 何と結合するか
16
12
のである 表 2 に示す結果で,以下の(a)~(d) そ
れぞれのコロニーに含まれる大腸菌はどれか。
下の解答群の1)~4) の中から, あてはまるもの
をすべて選べ。
(2) 制限酵素 H は, DNA 中のある特定の6個の塩基配列を認識して, その部分を切断する。
業中 本鎖DNA に A, G, T, C が偏 (かたよ) りなく分布していると仮定すると, 制限酵素 Hが認
実識する塩基配列は何塩基につき1回出現すると推定されるか
t
カナマイシ
(3)表 2 は操作8で出現したコロニー数をまとめたも
6024
4
表2 大腸菌のコロニー数
大腸菌の 計数に使用
希釈菌液 した培地
→4046
出現した
コロニー数
***
(a 培地で培養して生じたコロニー
培地 2
110
(b) 培地2で培養して生じたコロニー
TasV & tu
白色 25
希釈菌液 1
培地3
12d
青色 95
培地 4
4
160
希釈菌液3
培地 1
50
(c) 培地で培養して生じた白色のコロニー
(d)培地3で培養して生じた青色のコロニー
[解答群]
モニ
***各希釈菌液の 0.1mL を寒天培地に
プラスミドを取りこまなかった大腸菌
② lacZに外来遺伝子が組みこまれていな
プラスミドAを取りこんだ大腸菌
滴下して塗り拡げた。
③ lacZに外来遺伝子が組みこまれたプラスミドAを取りこんだ大腸菌
④ lacZにカナマイシン分解酵素の遺伝子の全部が組みこまれたプラスミドAを取りこみ、
組みこまれた遺伝子が発現した大腸菌
(4) 表2に示す結果をもとに, 操作(4)でDNAを混合した後の大腸菌液1mL中の, 以下の(a)~
(c)に示す大腸菌の数を求めよ。 計算結果はa× 10°の形式で表し, b は整数で答えよ。 ただし,
1つのコロニーは1個の大腸菌細胞に由来するものとする。
① すべての大腸菌
② lacZに外来遺伝子が組みこまれたプラスミドAを取りこんだ大腸菌
カナマイシン分解酵素の遺伝子の全部が組みこまれたプラスミドAを取りこみ,
その遺伝子が発現した大腸菌
(5) 操作(4)でDNAを混合した後の大腸菌の菌液1mLに含まれるすべての大腸菌の中で, プラ
スミドAに組みこまれたカナマイシン遺伝子が発現した大腸菌の割合を求めよ。 計算結果は,
百分率(パーセント) で答えよ。
021
2
001
001
[中央大〕
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