課題 D-2 下の図を参考に次の文章の空欄を埋めよ
大腸菌で組換えタンパク質を生産させる時には、大腸菌由来のタンパク質を取り除
き、目的のタンパク質を(① )する必要がある。そのために目的タンパク質に付加
されるのが(2 )と呼ばれるアミノ酸配列である。
市販の大腸菌用( 3 )ベクターであるPET156では、目的タンパク質遺伝子である
インサートの(4 )コドンを( 5 )のATGに合わせて挿入することで、が目的タン
パク質の(6)末端に( ⑦ )タンパク質として、ニッケルイオンと相互作用する
(His)6 配列が付加される。精製はゲル担体に固定された( ® )との( 9 )を利用
して行う。また、融合部にはトロンビンなどの認識部位が挿入されており、精製後、
当該( 0 )処理により、2を除けるように設計されている。
PET156 マルチクリーニングサイト周辺
T7 promoter primer #69348-3
T7 promoter
lac operator
rbs
Bgl||
AGATCTCGATCCCCCGAAATTAATACCACTCACTATAGGGGAATTGTGAGCGGATAACAATTCCCCTCTAGAAATAATTTTGTTTAACTTTAAGAAGGAG/
Xbal
Ncol
His-Tag
Nde l
Xhol BamHI
HetGlySerSerHIisHIsHI aHIsHIaHI aSerSerGlyLouVaiProArgGlySerHIsHetLcuGluAspProAlaAlaAsnLysAlaArg
Bpu1102|
thrombin
T7 terminator
AAGGAAGCTGAGTTGGCTGCTGCCACCGCTGAGCAATAACTAGCATAACCCCTTGGGGCCTCTAAACGGGTCTTGAGGGGTTTTTIG
LysGluAlaGluLcuAlaAlaAlaThrAlaGluGInEnd
T7 terminator primer #69337-3
