13 制限酵素とDNA リガーゼを用いて,次の実験 1 ~実験5を行った。 下記の各問い
(DNAの塩基対の数(塩基対数)は bp という記号で表し, 1000 bp = 1 kbp と表す。)
[実験 1 ] 制限酵素Aを用いて, 3.0 kbp の環状DNAを切断したところ1か所で切断された。
〔実験2] ある生物由来のDNA を制限酵素A で切断し, クローニングしたい遺伝子Zを含む1.5
kbpのDNA 断片を取り出した。
〔実験3〕 切断した2つのDNAを試験管内で混ぜた後、 適切な条件のもとでDNA リガーゼを加え,
それらのDNAを連結させて 4.5kbp の環状DNA を得た。
〔実験4〕 〔実験3〕 で得られた環状DNA を大腸菌に入れ, その大腸菌を培養した後, 増幅した環
状 DNA を大腸菌から取り出した｡
〔実験5〕 増幅した 4.5 kbpの環状DNAを3種類の制限酵素 A, B, C を使って切断すると、次に
示す DNA 断片が生じた。
制限酵素 A で切断
制限酵素AとBで切断
制限酵素AとCで切断 ->>
問1 3.0 kbp と 4.5 kbpの2つの環状DNAの塩基組成を調べたところ, 3.0 kbp の環状DNA に
含まれるアデニンの割合 (モル比) は 22.5%であり, 4.5 kbpの環状DNAに含まれるアデニ
ンの割合は 25.0%であった。 遺伝子Zを含む 1.5 kbp の DNA 断片に含まれるアデニンとシ
トシンの割合は,それぞれ何%か。 アデニン[
%] シトシン[ H %]
問2 遺伝子Zを含む 1.5 kbpの塩基配列の中で, アミノ酸の指定に使われている塩基配列は50
%であった。 遺伝子Zから何個のアミノ酸が指定されるか。
[
1
問3 4.5kbの環状DNAに制限酵素Bと制限酵素Cを同時に加えて切断すると,2つの断片が
生じた。 それらのDNA 断片の塩基対数は, それぞれ何kbpか｡ 生じた塩基対数の組み合わせを,
すべて答えよ。 [
]
生じたDNA 断片 (kbp) 3.0 と1.5
生じたDNA 断片 (kbp) 2.0と1.5と1.0
生じたDNA 断片 (kbp) 3.0 と 1.0と0.5
