Biology
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わかりやすく教えてください🙇
72. 制限酵素地図 遺伝子Xの線状 DNA
を制限酵素 EcoRIのみ, 制限酵素 BamHI の
み、およびEcoRI と BamHI 両者を含むそれ 塩基対
ぞれの反応液中で切断反応を行った。それぞ
れの反応で得られた反応液をマーカー(塩基
対の数と電気泳動での移動距離との関係を知
るための基準となる印) とともに寒天ゲルを
用いて電気泳動して, 切断反応によって生じ
たDNA 断片の塩基対の数を調べ, 図のよう
な結果を得た。実験結果をもとに, 記入例に
ならって遺伝子Xの制限酵素地図を記せ。 な
お,電気泳動を行うと、 短い DNAほど速く
寒天ゲル中を移動するため, 原点からの移動
距離(移動度)を測定することで, DNA の塩基
対の数を推定することができる。 [15 立命館大)
ECORI
+BamHI
マーカー
EcoRI
BamHI
の数
10000
8000
6000
4000
2000
1000
電気泳動の結果
(記入例)
E B
E
1000 1000
3000
1500
原点からの移動距離
コ
AMH
72
B E
B
1500 1000
2000
5500
右図のように、 DNA 断片の左端をX.
右端をYと仮定する。ECORI で処理すると、
この DNA は1か所(右図Eの部位)で切断
され,2500 塩基対と7500 塩基対の2つの断片ができる。
次に,ECORI と BamHI の両方を使った
場合,1000, 1500, 2000,5500 の4つの
断片ができる。よって,BamHI は XE を
1000 と 1500 に, EY を 2000 と 5500 に切 ×
断することがわかる。ここで,右図のよ
うに,BamHI がXEを切断する部位をB1,
EY を切断する部位を B2 とする。
BamHI のみで DNA を切断する場合は,
断片は,1500, 3000, 5500 の3つである
から,右図のように, B1E = 1500 とする
と, EB2 = 2000 または 5500であることか
解説
X
E
2500
7500
B1 は XE を1000 と
B2 は EY を2000と
5500 に切断する
1500に切断する
B1
B2
レ
E
2500
7500
B1E=1500 の場合
の0OV
B2 ) B2
2000
X
B1
U0
1000 1500
5500
ら,B1B2
= 3500 または 7000 となり、実 A
NG Oお対
験結果と矛盾する。
なる。
こるので
B1E
1000 とすると, EB2 = 2000 の
B1E=1000 の場合
場合にB1B2 = 3000, B2Y = 5500 となり,
X
B1
E
B2
Y
実験結果と同じになる。
なお,解答の図は, 左右逆でも正解である。
1500 1000
2000
5500
山-
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なるほど！ありがとうございます！！