Question

A

分かりやすく教えていただきたいです。

大腸菌Aにはゲノムに遺伝子 X領域をもつ。この領域をプライマー①と②で増幅したものを試料 (DNA 試料(4)) と
して列4にアプライした。 次に, 大腸菌 Aによる汚染が疑われる牛肉試料を用いて大腸菌 A の検出を試みた。 この牛
肉試料から抽出したすべてのDNAを鋳型としてプライマー ①と②でPCR を行い, DNA 試料(1) を得た。 さらに,プ
ライマー ①と③, プライマー ②と④ で PCR をそれぞれ行った試料を DNA 試料(2),(3)とした。 なお、プライマー ①〜
④はすべて異なる配列である。
領域X
5 mm
プライマー
3 www
領域X
5'mmmm
3°
wwwm 3°
w
プライマー②
プライマー①
3
プライマー (3
IM 5'
EMS 5'
↓PCRによる増幅
領域X
3
領域 X
||||
3'
プライマー
5
5
1000塩基対の2本鎖DNA 断片
図1
(1) 図4のアの位置のバンドは何に由来すると考えられるか。
5'mm
プライマー①
3
図 3
(2)DNA 試料(1), (3) で見られたイのバンドに含まれる塩基配列はそれぞれ全く同じであった。 このことからイの位置
のバンドが生じた理由を説明せよ。
電極
501
列2
列3
列4
矢印(7)
-10,000
5.000
塩基対
- 30.000
列1 DNA試料(1)
2.500
列2 DNA 試料(2)
矢印(イ)
2.000
500
C
1.000
列3 DNA 試料(3)
BAZERES
750
列4 DNA 試料(4)
500
電極
この電気泳動では30,000塩基対以上の長い DNA は分離できずに1本のバンドとなる。
4

pcr

Answer 1

✨ Best Answer ✨

ひなひな

まずI問目ですが、候補として考えられるのは、
鋳型DNA、プライマー、dNTPs、DNAポリメラーゼ、ゲノム遺伝子X領域の五つです。
右下の図から分かるように、この実験では、電気泳動にかけられているので、大きいものは上側に行きます。そして、アは、一番上なので、先ほどあげた候補の中で一番大きいということで、鋳型DNAですよね。
今回の回答に合わせたら、
牛肉試料から抽出された（増幅されなかった）元のゲノムDNA
というのが正解だと思います。PCRで増幅された産物かとも一瞬思いましたが、それは数千塩基程度なので、右下の図のメモリの三万には敵わないので違うと判断しました。

問い2！
全く同じ塩基配列ってどういうことだよ！と思ったかもしれませんが、これは、同じ種類のプライマーが作成に関与したということです。問題文より、PCR を行う時、試料Iと3で同じプライマーは②です。だからさっきの特定のプライマーは②のことです。
ちょっと待て！PCRは2種類のプライマーで挟まれた領域を増幅するんだろと思ったかもしれませんが、例外は常にあるものです。
プライマー②2こに挟まれててもいけます。離れた配列にいれば。だから配列イには変なスキマがあったんです。

プライマー②が結合できる配列が、ゲノム上の(イ)のバンドの長さに相当する距離を隔てて、互いに向き合う形で2箇所に存在したため。がこたえで良いと思います。

A

ご丁寧に解説していただきありがとうございます😭
ベストアンサーにさせていただきます🙇‍♀️🙇‍♀️