生物
高校生
解決済み

(2)の説明お願いします🙇‍♀️💦

マーカーの部分が特にわかりません!

圏84.次の文章を読み, 以下の問いに答えよ。 レーン M:DNA分子量マーカー レーン1:ECORI 切断(10kbp) レーン2:HindllI 切断(10 kbp) レーン3:PstI 切断(6 kbp, 4kbp) レーン 4:ECORI+HindIII 切断(9.5 kbp, 0.5 kbp) レーン5:EcoRI+PstI 切断(6 kbp, 3.5 kbp, o.5kbn) レーン6:HindllI+PstI 切断(6kbp, 3 kbp, 1 kbp) ( )内には, 制限酵素処理後に得られた DNA 断片 のサイズを示す。 M 123 4 5 6 (kbp) 2本鎖 DNA を いくつかの制限酵 素で切断し、それ らの切断部位を決 定することで制限 酵素地図が作成で きる。あるプラス 主 23|一 9.4 6.6 4.4 2.3 2.0 0.56 ミド(10,000 塩基 対数,10 kbp)を3 種類の制限酵素(EcoRI, HindII, PstI )およびそれらの組み合わせで切断した後 ア ガロースゲルを用いた電気泳動で断片を解析した。得られた電気泳動像を模式化した ものが図1である。 (1)図1をもとに作 成したこのプラ スミドの制限酵 素地図を(ア)~(エ) から選べ。なお, 図の1目盛りは1kbp を表している。 (2) 別のプラスミドを制限酵素 MfeI で切断して 得た1kbp の DNA 断片がある。この DNA 断 片内には ECORI, HindII および PstI の認識 部位は存在しない。この DNA断片を, 下線 部のプラスミドのECORI 切断部位に挿入した。 なお, ECORI とMfeI の認識部位と切断後の末 端部分を図2に示す。 この遺伝子組換え操作 により新しくで きたプラスミド (11kbp) の制限 EcoRI-{ 酵素地図を(ア)~ (エ)から選べ。な お,図の1目盛りは1kbp を表している。 図1 PstI PstI HindIII X ECORI PstI HindIII PstI EcoRI HindIII -HindIII ECORI^ イ) (ウ) EcoRI PstI PstI PstI Pstl 化 ら 制限酵素認識部位の配列切断後の末端部分 ITT GAATTC CTTAAG TIL|L T TI G AATTC CTTAA TI||I ト EcoRI G TTI|| C AATTG GTTAA T TTI T T CAATTG GTTAAC T|||L Mfel C 図2 AMG O る HindIII Pstl Mfely Nigg EcoRI Pstl h Mfel. HindlII- PstI EcoRI rh, ECORI -HindlI HindII (ア) PstI (つ) Pstl 日) Pstl Pstl 合[16 京都大) 1 1
(短い鎖+短い鎖)→次の増幅で, (短い鎖+短い鎖)の DNAが2 *(オペ クトー が転写 84 (1) ウ (2) イ うされ 言合能 (1)レーン4から ECORI と HindIIの DNA 断片で最も短いものは 0.5kbp の断片である。 よって、 ECORI と HindIIの切断部位は. 0.5kbp 離れた場所に存在することになる。 よって,(イ)ではない。レーン5から ECORI と PstI の切断部位は 0.5kbp 離れている。 (アは最も近いもので1kbp, (エ)は最も近いもので1.5kbp離れているので誤り。よう (て,(ウ)が正しい。 「解説 ース 生 スが 謝遣 2と5 い (2) EcoRIの切断面の1本鎖部分の塩基配列と MfeI の切断面の1本鎖の塩基配列か相 補的であることから, 互いの切断部分で結合が起こったと考えればよい。 EcoRIの 切断面の塩基配列は下図(a)で, MfeI の切断面は下図(b)である。よって, 両者の断 片が結合すると,下図(c)のようになる。 はい ル 88 合のでいに っら -る ーチロにッ(b) ホ9月お可 内内面立à C う さ AAIIE S 年 O TT 9 バち開 での この結合によってつくられた塩基配列は,EcoRI や MfeI が認識して切断する 塩基配列と異なるため, 11 kbp のプラスミドの制限酵素地図では, この結合部は、 ECORI も MfeIも認識できない。よって, EcoRI と, MfeI のない図を探せばよい。 CAATTC GTTAAG GAATTG C CTIAAC す

回答

✨ ベストアンサー ✨

結合によって作られた塩基配列は(c)ですよね。
(c)の塩基配列はEcoRIやMfeIの認識部位の配列とは違いますよね(認識部位の配列は表に書かれてますよね)?
すなわち、(c)の塩基配列はEcoRIやMfeIによって切断されません
すなわち、結合によって作られた塩基配列はEcoRIやMfeIによって切断されません

分からなければ質問してください

もともと

返信遅くなってしまいすいません🙇‍♀️

初歩的な質問なのですが、制限酵素は6つの塩基が同じでないと切れないのですか?

たこ焼き

制限酵素は認識部位の配列と全く同じでないと、切れません
今回のEcoRIやMfeIは認識部位の配列が6つの塩基だから、6つの塩基が同じ並びでないと、切れません
別の制限酵素になると、認識部位の配列が異なるので、6つの塩基が同じ並びでないといけないとは言えなくなります。認識部位の配列が4塩基なら、4つの塩基が同じ並びなら切れます。

分からなければ質問してください

もともと

とても分かりました!

丁寧な解説ありがとうございます✨

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