生物
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(3)がわかりません

18| DNA の塩基配列を化学的に決定する方法にサンガーの方法がある。 この方法の後略は 次の 4 つの操作に分けられる。 【操作 1] 2 本償DNA を分離し, 1 本鎖DNA を調製する。 【操作 2] 得られた 1 本針 DNA を 4 つの試料に分け, そのすべてにプライマー, DNA ポ リメラーゼ (DNA 合成酵素)。 および4種類のヌクレオチド(dA, dG, dC, dT) を入 れ, さらに, 4 種類の特殊なヌクレオチド(dA. dG. dC. dT1のいずれか1】 種類を 少量活加して DNA 合成を行わせる。 通常のヌクレオチドに混ざって, 特殊なをヌクレ オチドも新生鎖の中に取りこまれるが, 符殊なヌクレオチドが取りこまれると, その 時点でDNA 合成反応を停止する。特殊なヌクレオチドがどのタイミングで取りこま れたかによって, いろいろな長さの DNA 断片が得られる。 【操作 3] 操作 2 で得た DNA 断片を含む試料を,。 それ 加えた特殊なヌクレオチド ぞれ特殊な高分子席の上敵(図の上端部) におき, ーー Sc er 電気涼動法を用いて断打の分交換作を行う。これ 理| 割 : によって, DNA 断丘はその塩基配列の長さに応じ Bl 秋 = て分離され, 短いほど吉く (図の下方) へ移動する。 を と プ 近作 人 状に分離された DNA 断所の並び方から cc 、 DNA の培基配列を読み取る。 有 Ce ) タンバク質のアミノ酸配列から DNA の塩基を一通り決めることは可能か不可能か 下線部で, 例えば反応液中の dA。dG, dC, dT の濃度を一定にし, ず4 濃度を増加 凍OO し ot ) 短いものが多くなる。 K 7 5 に示された部分についで N 4 ただし, ポリメラーゼによって れ にA, G, C, を用
(0) 不可能である。 ⑫⑳ ウ ⑬ TCGACCGT Q) メチオニンとトリプトファンのコドンはそれぞれ AUG, UGG の 1 種類ずつで ある。しかし, これら以外のアミノ酸は 2 租以上のコドンに対応している。例え ば アルギニンは, 対応するコドンが6種類(CGU, CGC, CGA, CGG, AGA, AGG) 存在する。したがって, アミ ノ酸配列から 1 種類の地共配列を特定することはできな い。 (2) このDNA の塩基配列の決定法をサンガー法 という. 問題中の ずAずG, dC。 dTは通 し RY 滞の dA。dG, dC, dTのヌクレオチド(デオォキ し シリボヌクレオ- ン多)の3' の 0H基が 日基になった特殊なメクレオチド(ジデオキシ リポヌクレオ ン酸) である。 この特殊 なヌクレオチドでは 3' の OH 基がないため, 隔5 上 のヌクレオチドが結合できず, そこでDNA できない| 合成が止まる。通常のタクレオチドを入れた 反応液中に少量の すA を加えると, dA と競い合いながら合成中の DNA 鎖に取りこま れていく。多型名の塩基がTのところでdAが取りこまれると DNA合成は進行する が, 9A が取りこまれるとそこで DNA 合成が停止する。 したがって, どの段階で dA が取りこまれるかによって, いろいろな長さの新生 DNA 貧が合成される。 ずA の渡度が大きいと A が合成中の DNA 鎖に取りこまれる確宰が高くなるの 新生 DNA 鎖はあまり促長できず知くなりやすい。なお, (イ)(エ)について | JEに 1 0 PU (3) 涼動距離が量も長いものが, AdG doC dr @ 少ないヌクレオチド鎮である。 したがって。 き 図の下部にある断所から順に、加えた特殊な ヌクレオチドの塩基を読んでいけばよい も短い DNA 鎖に取りこまれたのは す 月に短い DNA 名に取りこまれた の次が dG, dA。… となり, 有有| 読んでいくと, 合成されたDNA, TOCGACCGT となる。

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