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DNA の塩基配列を化学的に決定する方法にサンガーの方法がある。 この方法の後略は
次の 4 つの操作に分けられる。
【操作 1] 2 本償DNA を分離し, 1 本鎖DNA を調製する。
【操作 2] 得られた 1 本針 DNA を 4 つの試料に分け, そのすべてにプライマー, DNA ポ
リメラーゼ (DNA 合成酵素)。 および4種類のヌクレオチド(dA, dG, dC, dT) を入
れ, さらに, 4 種類の特殊なヌクレオチド(dA. dG. dC. dT1のいずれか1】 種類を
少量活加して DNA 合成を行わせる。 通常のヌクレオチドに混ざって, 特殊なをヌクレ
オチドも新生鎖の中に取りこまれるが, 符殊なヌクレオチドが取りこまれると, その
時点でDNA 合成反応を停止する。特殊なヌクレオチドがどのタイミングで取りこま
れたかによって, いろいろな長さの DNA 断片が得られる。
【操作 3] 操作 2 で得た DNA 断片を含む試料を,。 それ 加えた特殊なヌクレオチド
ぞれ特殊な高分子席の上敵(図の上端部) におき, ーー Sc er
電気涼動法を用いて断打の分交換作を行う。これ 理| 割 :
によって, DNA 断丘はその塩基配列の長さに応じ Bl 秋 =
て分離され, 短いほど吉く (図の下方) へ移動する。 を と プ
近作 人 状に分離された DNA 断所の並び方から cc
、 DNA の培基配列を読み取る。 有 Ce
) タンバク質のアミノ酸配列から DNA の塩基を一通り決めることは可能か不可能か
下線部で, 例えば反応液中の dA。dG, dC, dT の濃度を一定にし, ず4 濃度を増加
凍OO し ot
) 短いものが多くなる。 K 7 5
に示された部分についで N 4 ただし,
ポリメラーゼによって れ
にA, G, C, を用
