発展問題A-113
110>次の文章を読み,下の問いに答えよ。
図1はあるウイルスの DNAの 0
一部であり,ここから一つの -
RNA が転写される。図中の数字
は、DNA の末端からの距離をュ
ニットの単位で表し、1ユニット
は360 塩基対を含む DNAの長さを表すものとす
る。領域Tにはプロモーターがあり,転写はこの
領域内にある一つの転写開始点から開始されて図 2.0
1に示す方向に進む。領域Tにある正確な転写開
始点を調べるために, 領域Tを制限酵素により
様々な位置で切断し,それらの断片から合成され
る RNA 断片の長さを調べることにした。
まず, PCR 法を用いて領域Tをクローニングし,
3種類の制限酵素A~Cを使用して領域Tを断片園
化した。ゲル電気泳動により, 断片化された
DNA をそれぞれの長さにしたがって分離した結果を図2に示す。各酵素を単独に作用
させると,それぞれ2個の断片に分かれた。また,A~Cの3種類の酵素すべてを用い
たときには,領域Tは4個に断片化されたが,そのうち2個の断片は同じ長さであった。
次に,領域TをA~Cの各酵素を用いて別々に切断し,その DNA 断片から合成され
る RNA の長さを調べた。そのために,各DNA断片をある細胞の抽出液に放射性同位
元素で標識したヌクレオチドを加えて RNA を合成させた。生成物をゲル電気泳動によ
り長さにしたがって分離し, 新しく生成された RNA のみを検出した。その結果,酵素
日
15.6 18.0
転写の方向
領域T
io
図1 あるウイルスのDNAの一部
(1ユニット:DNA360塩基対の長さ)
A BC
A+B+C
1.6
0
1.0
図2 ゲル電気泳動の結果
数字はDNA断片の長さをユニットで示す。
り
Aによって断片化された DNA からは324塩基の RNAのバンドが1本検出された。酵
素Bによって断片化された DNAからは324塩基よりも長い RNA のバンドが1本検出
された。また,酵素Cによって断片化された DNA からは, 324塩基より短い RNA の
バンドが1本検出された。
問1 酵素Aと酵素Bによる切断点の距離は何ユニットか。また、 酵素Bと酵素Cによ
る切断点の距離は何ユニットか。それぞれ次の①~③から一つずつ選べ。 勤をる
Io
00.2
20.4
30.6
の0.8 6 1.0 ⑥1.2
の1.4
1.6
問2 B, Cの酵素によって断片化された DNA から合成された RNA の塩基数を,そ
れぞれ次のD~③から一つずつ選べ。
1 72
2 108
③ 144
4 180
5 486
6 540
の612
8 684
問3 これらの結果から, 転写開始点は図1に示した DNAの末端から何ユニットの距
離にあると結論できるか。 次の①~④から一つ選べ。
0 15.7
② 16.1
316.5
の 17.3
(11 北里大改)
泳動の方向
