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生物 高校生

問5、問6がなぜそうなるか分かりません。 2枚目は答えです、よろしくお願いします🙇‍♀️

1. 1990 年代後半からこれまでに, 1,000 種類を超える生物のゲノムの全塩基配列が明らかにされている。 2020 兵庫県立大学 3/8,中期 理 (笑1)A POS N たは, およそ 30 億塩基対からなるヒトゲノムの全配列が決定された。ヒトには約 22,000 個の遺伝す のると見積もられているが、ゲノムのどの部分にどのような清伝子があるのかを明らかにするためには,生 1体内で発現しているすべての MRNA の塩基配列の解読が必要である。MRNA の塩基配列を直接決定すoこと はむずかしいため, MRNA と相補的な配列の DNA(CDNA)を試験管内で合成してから塩基配列の決定を行つ。 以下は,DNA 配列決定までの手順である。 . NNA を鋳型にして DNA を合成する逆転写酵素および。DNAポリメラーゼの2つの酵素を利用して2本鎖 の CDNA を合成する。 2. CDNA を。制限酵素で切断する。 3. 切断した CDNA 断片を適切に切断したプラスミドと DNA リガーゼで連結し, 大腸菌に導入する。 4. 形質転換された大腸菌からプラスミドを精製する。 5.それぞれのプラスミドに組み込まれた CDNA の配列をサンガー法で決定する。 このようにして解読された CDNA の塩基配列をゲノムの塩基配列と比較することで, ゲノム上に散らばって 存在する遺伝子の場所や構造を明らかにすることができるのである。 問5下線部のについて, DNAポリメラーゼは鋳型 DNA と相補的なヌクレオチドを次々に連結するが, 10,000 ヌクレオチドに1 回程度の頻度で間違ったヌクレオチドを連結することがある。このような合成のミス は DNA ポリメラーゼによりどのように修正されるか, 40字程度で説明せよ。 問 6.下線部3について, ヒトゲノム DNA を特定の 4塩基配列のみを認識して切断する制限酵素で処理する と, DNA は平均で何塩基対に一度の頻度で切断されるか。ただし,ヒトゲノムDNA の GC含量は 50%で A, G, C, Tの並び方はランダムであると仮定せよ。 DNA 複製の起点 問7.図3-2に使用したプラスミドの構造を示す。 アンピ シリン(抗生物質)耐性遺伝子は何のために必要である 塩基配列の決定に 使用したプライマー のか, 30字程度で答えよ。 CDNA アンピシリン 耐性遺伝子 問8.表3-1に示した4種類の反応液を調製し,サンガー 法を用いて CDNA の塩基配列を決定した。 図3-2 表3-1 サンガー法の反応液の組成 反応液 反応液2] 反応液図 反応液園 プラスミド プラスミド プラスミド ro プラスミド DNAボリメラーゼ注1)| DNAポリメラーゼ注1) DNA ボリメラーゼ注1 DNAボリメラーゼ注1) プライマー プライマー プライマー プライマー A7 G |ヌクレオチド A A- G ヌクレオチド C G ヌクレオチド C ヌクレオチド C T. 特殊な T T_ 特殊な 特殊な 特殊な スクレオチド注 2) |Gヌクレオチド注2)|Cヌクレオチド注2)|Tヌクレオチド 注2) 注)耐熱性のDNA ポリメラーゼを用いた。 注2) 特殊なヌクレオチドには検出可能な線識が施してある。また, この標識は DNA合成反応には影響しない。 AGCT 特G

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生物 高校生

電気泳動の問題ですが、どういう実験なのか、またどうして解答のような図が書けるのか解説を読んでもよく分かりません。教えてください😣

発展問題A-113 110>次の文章を読み,下の問いに答えよ。 図1はあるウイルスの DNAの 0 一部であり,ここから一つの - RNA が転写される。図中の数字 は、DNA の末端からの距離をュ ニットの単位で表し、1ユニット は360 塩基対を含む DNAの長さを表すものとす る。領域Tにはプロモーターがあり,転写はこの 領域内にある一つの転写開始点から開始されて図 2.0 1に示す方向に進む。領域Tにある正確な転写開 始点を調べるために, 領域Tを制限酵素により 様々な位置で切断し,それらの断片から合成され る RNA 断片の長さを調べることにした。 まず, PCR 法を用いて領域Tをクローニングし, 3種類の制限酵素A~Cを使用して領域Tを断片園 化した。ゲル電気泳動により, 断片化された DNA をそれぞれの長さにしたがって分離した結果を図2に示す。各酵素を単独に作用 させると,それぞれ2個の断片に分かれた。また,A~Cの3種類の酵素すべてを用い たときには,領域Tは4個に断片化されたが,そのうち2個の断片は同じ長さであった。 次に,領域TをA~Cの各酵素を用いて別々に切断し,その DNA 断片から合成され る RNA の長さを調べた。そのために,各DNA断片をある細胞の抽出液に放射性同位 元素で標識したヌクレオチドを加えて RNA を合成させた。生成物をゲル電気泳動によ り長さにしたがって分離し, 新しく生成された RNA のみを検出した。その結果,酵素 日 15.6 18.0 転写の方向 領域T io 図1 あるウイルスのDNAの一部 (1ユニット:DNA360塩基対の長さ) A BC A+B+C 1.6 0 1.0 図2 ゲル電気泳動の結果 数字はDNA断片の長さをユニットで示す。 り Aによって断片化された DNA からは324塩基の RNAのバンドが1本検出された。酵 素Bによって断片化された DNAからは324塩基よりも長い RNA のバンドが1本検出 された。また,酵素Cによって断片化された DNA からは, 324塩基より短い RNA の バンドが1本検出された。 問1 酵素Aと酵素Bによる切断点の距離は何ユニットか。また、 酵素Bと酵素Cによ る切断点の距離は何ユニットか。それぞれ次の①~③から一つずつ選べ。 勤をる Io 00.2 20.4 30.6 の0.8 6 1.0 ⑥1.2 の1.4 1.6 問2 B, Cの酵素によって断片化された DNA から合成された RNA の塩基数を,そ れぞれ次のD~③から一つずつ選べ。 1 72 2 108 ③ 144 4 180 5 486 6 540 の612 8 684 問3 これらの結果から, 転写開始点は図1に示した DNAの末端から何ユニットの距 離にあると結論できるか。 次の①~④から一つ選べ。 0 15.7 ② 16.1 316.5 の 17.3 (11 北里大改) 泳動の方向

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生物 高校生

電気泳動の問題ですが、どういう実験をしているのか、またどうして解答のような図が書けるのかも分かりません。教えてください🙇‍♂️

発展問題A 113 110>次の文章を読み,下の問いに答えよ。 図1はあるウイルスの DNA の 0 一部であり,ここから一つの RNA が転写される。図中の数字 は、DNA の末端からの距離をュ ニットの単位で表し,1ユニット は360 塩基対を含む DNA の長さを表すものとす る。領域Tにはプロモーターがあり,転写はこの 領域内にある一つの転写開始点から開始されて図 2.0 1に示す方向に進む。 領域Tにある正確な転写開 始点を調べるために, 領域Tを制限酵素により 様々な位置で切断し、それらの断片から合成され る RNA 断片の長さを調べることにした。 まず, PCR 法を用いて領域Tをクローニングし, 15.6 18.0 転写の方向 領域T 5 図1 あるウイルスのDNAの一部 (1ユニット:DNA360塩基対の長さ) A BC A+B+C 1.6 0 1.0 3種類の制限酵素A~Cを使用して領域Tを断片 図2ゲル電気泳動の結果 化した。ゲル電気泳動により, 断片化された『に DNA をそれぞれの長さにしたがって分離した結果を図2に示す。 各酵素を単独に作用 させると、それぞれ2個の断片に分かれた。また,A~Cの3種類の酵素すべてを用い たときには,領域Tは4個に断片化されたが,そのうち2個の断片は同じ長さであった。 次に,領域TをA~Cの各酵素を用いて別々に切断し,その DNA断片から合成され る RNA の長さを調べた。そのために,各DNA 断片をある細胞の抽出液に放射性同位 元素で標識したスクレオチドを加えて RNA を合成させた。生成物をゲル電気泳動によ り長さにしたがって分離し, 新しく生成された RNA のみを検出した。その結果, 酵素 Aによって断片化された DNA からは 324塩基の RNA のバンドが1本検出された。 酵 素Bによって断片化された DNAからは324塩基よりも長い RNAのバンドが1本検出 された。また,酵素Cによって断片化された DNA からは, 324塩基より短い RNAの バンドが1本検出された。 問1 酵素Aと酵素Bによる切断点の距離は何ユニットか。また、 酵素Bと酵素Cによ る切断点の距離は何ユニットか。 それぞれ次の①~③から一つずつ選べ。 5 数字はDNA断片の長さをユニットで示す。 0- 5 ASTF 00.2 20.4 30.6 0.8 Y⑤ 1.0 61.2 の1.4 81.6 問2 B, Cの酵素によって断片化された DNA から合成されたRNA の塩基数を,そ れぞれ次のD~③から一つずつ選べ。 072 2 108 ③ 144 4 180 ⑤ 486 6540 の612 8 684 問3 これらの結果から, 転写開始点は図1に示した DNAの末端から何ユニットの距 離にあると結論できるか。 次の①~④から一つ選べ。 In ① 15.7 216.1 ③ 16.5 の17.3 (11 北里大改) 泳動の方向

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